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随着分子生物技术在人类基因组测序、人类遗传病、传染病和癌证的临床诊断、生物工程药物的筛选、动植物杂交育种、动物亲子鉴定和性别鉴定、植物疾病诊断、法医鉴定等方面的应用,科学工作者越来越需要一种自动化程度更高,应用更广泛,价格更为适中的遗传分析仪,为满足这种需要,美国Applied Biosystems公司于1995年推出了310型全自动遗传分析仪,310型不仅具有DNA测序、PCR片段大小分析和定量分析功能,而且实现了全部操作自动化,包括自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析。

310型全自动遗传分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳进行DNA测序分析,繁锁的灌胶和上样过程全部由泵和自动进样器完成。每次测序之前,只需把样品放到自动进样品的样品盘中,设置电泳参数、数据收集和分析参数即可。Applied Biosystmes公司提供经多年潜心研究的专利产品-凝胶高分子聚合物,包括DNA测序胶和GeneScan胶,凝胶颗粒孔径均一,避免了配胶条件不一致对测序精度的影响。此外,Applied Biosystems公司还提供各种试剂盒,应用软件和全球性的技术支持。


310型基因分析仪

310型全自动DNA测序仪具有以下特点:

l 应用广泛

序及片段分析的应用包括未知序列测定、已知序列的比较测序、杂合子分析(Heterozygote Detection)、SSCP分析(SSCP Analysis)、微卫星序列分析(Microsatellite Analysis)、长片段PCR(分析Long PCR)等

l 自动化程度高

自动灌胶:在分析一个样品前,泵自动冲掉上一次分析用过的胶,灌入新胶。

自动取样:把待测样品放到自动进样器的样品盘中,由计算机程序控制自动进样。自动进样器有48孔和96孔两种样品盘,其中96孔样品盘与本公司9600型PCR仪的样品盘一致,所以经PCR循环测序反应的样品可直接放到310测序仪中测序,此外特殊设计的样品盖可防止蒸发。

l 多色荧光毛细管测序技术:

由于采用专利四色荧光标记技术,使四个测序反应产物可以在一根毛细管内电泳,使毛细管测序成为可能,同时也大大提高了测序精度,即降低了同位素测序因泳道间迁移率差异对精度的影响。而且与377型遗传分析仪一样,310型遗传分析仪也采用CCD摄像机作为检测器,使每个样品分析时间仅为2.5小时。

l 全自动电脑控制:

只需把测序样品放到自动进器样品盘中,输入样品信息,如:进样次序、进样时间和电压,和数据分析模式,如:SSCP、微卫星序列、VNTRS、DNA序列分析等模式,其余的工作,如:灌胶、进样、电泳、检测、数据分析全部由电脑控制进行。此外电脑还控制电泳的温度、电压、时间,同步监测电泳的情况,在分析上一个样品数据的同时还可以收集下一个样品的数据。

l 丰富的应用试剂盒及软件

Applied Biosystems公司提供多种应用试剂盒及应用软件,如用于亲子鉴定和个体识别的 Profiler Plus, Cofiler, SGM plus试剂盒,用于真菌鉴定分型的D2 rRNA测序试剂盒,用于器官移植配型分析的HLA基因测序试剂盒,用于细菌鉴定分型的16s rRNA测序试剂盒,用于爱滋病毒突变检测及新药研发的HIV Genotyping试剂盒,用于脆性X检测的Fragile X试剂盒,用于单核苷酸多态性分析的SNapshot试剂盒,用于动植物育种、基因组作图及差异显示的AFLP试剂盒等,广泛应用于人类、动植物、微生物等各项研究领域。

性能指标:

310型遗传分析仪性能表

应用举例 分离胶 毛细管 电泳时间及温度 分辨大小 24小时产率
标准测序 DNA测序 POP-6 内径50mm 2.75 hr 600Nt 5220Nt
长度61cm 50°C
快速测序 比较测序 POP-6 内径50mm 60 min 400Nt 9120Nt
长度47cm 50°C
片段大小分析 微卫星分析 POP-4 内径50mm 30 min 350Nt 720个片段
差异显示AFLPs 长度47cm 60°C
VNTRs 3.0%片段分析胶 内径50mm 21 min 350Nt 204个样品
长度47cm 30°C
突变检测 SSCP 3.0%片段分析 内径50mm 20 min 300Nt 72个样品
10%甘油 长度47cm 30°C
定量 RT-PCR 3.0%片段 内径50mm 22 min 1000Nt 195个样品
分析胶 长度47cm 30°C

检测系统 CCD 检测荧光波长范围 525-650 nm
光源 氩离子激光光源 激发波长 488nm和4nm
激发功率 10mW 电泳电压 100V – 15000V
灌胶泵 压力可高达1,800psi 样品盘 48孔或96孔
(两种规格)
控温板 毛细管 温度范围 室温-60°C
电脑 苹果G3电脑或同级别电脑
打印机 Epson Stylus Color 900型或850型打印机

电泳系统 宽度—60.96cm 高度—86.36cm 深度—55.88cm 重量—94.5kg
电脑系统 宽度—35.5cm 高度—45.5cm 深度—43.0cm 重量—27.50kg
打印机 宽度—46.75cm 高度—32.50cm 深度29.60cm 重量—8.33kg

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